La mission du Musée Royal 22e Régiment est d'acquérir, conserver et mettre en valeur les artefacts et les documents historiques relatant l'histoire et les valeurs du Royal 22e Régiment ainsi que l'histoire de la Citadelle de Québec, dans le contexte de l'histoire militaire du Canada.
De plus, par ses actions de diffusion et d'éducation, il rend disponible au bénéfice de tous ses visiteurs, les faits d'armes du Régiment et son histoire au Québec, au Canada et à l'étranger, raconte l'histoire de la Citadelle depuis le régime français et explique la fonction historique des bâtiments actuels de cette dernière.